La commande de cette œuvre doit émaner de la donatrice en prière figurée sur le volet droit du triptyque, qui semble être une clarisse introduite par saint Jean. La présence de saint François d'Assise recevant les stigmates sur le volet latéral gauche semble confirmer cette hypothèse. Cette œuvre combine de manière originale la représentation de sainte Anne trinitaire, figurée comme à l'accoutumée portant la Vierge et l'Enfant Jésus sur ses genoux d'une part, ainsi que celle de la sainte parenté d'autre part, qui bien que proche de l'iconographie de l'arbre de Jessé, est présentée ici sans aucune ramification. Autour de sainte Anne sont figurés ses maris ainsi que sa descendance. Cette filiation est d'abord décrite par Aymon d'Halberstadt au IXe siècle dans son Historiae sacrae epitome qui dénombre 17 personnes puis est reprise par Jacques de Voragine dans la Légende dorée. Ainsi à droite on reconnaît Elisabeth, Jean Baptiste puis en dessous, Cléophas, Marie Cléophe, avec les petits Jacques Mineur et Joseph Jusus ainsi qu'Alpheus en bas à droite. Au pied de la sainte Anne trinitaire se trouvent les jeunes Simon et Judas Tadeus. Zebedeus accompagné de Jacob Majeur sont représentés en bas à gauche, tandis qu'au-dessus sont représentés Marie Salomé et Jean Alba. Enfin, sur la partie supérieure droite du panneau central, on retrouve Salomé, Eliud, Joseph, Joachim et ce qui semble être Emérencie. Ce thème de tradition immaculiste s'observe également sur un tableau conservé au musée des beaux-arts de Gand du Maître de la famille de sainte Anne, actif à Gand vers 1500-1510 (74 x 113,9 cm, inv. 1906-B) ainsi que sur une œuvre de Derick Baegert (124,3 x 154 cm, inv. : 123) du musée des Beaux-Arts d'Anvers. Cette dévotion connaît alors une ferveur toute particulière dans les Pays-Bas vers 1500.